Sumário: I - Table of Contents, II - List of figures III - List of tables, IV - Abbreviations, Chapter. I, p.27; General Introduction, p.29; 1. Diabetes Mellitus: definition, epidemiologics and diagnosis, p.29; 1.1. Type 1 DM: pathogenesis, clinical onset and related chronic complications, p.31; 1.2. Proteomics and peptidomics of biofluids for DM characterization, p.34; 1.3. Saliva as diagnostic fluid, p.39; 1.3.1. Salivás protein profile vs, physiological role, p.40; 1.3.2. Proteome profiling of saliva, p.44; 1.3.3. Salivary proteomics and peptidomics in clinical diagnosis, p.49; 1.4. Aplication of salivary proteomics and peptidomics to DM, p.54; Alims, p.61; Chapter. II - Experimental work, p.63; Study I - Salivar peptidome in type 1 diabetes mellitus, p.65; Study II - Protease profiling of different biofluids type 1 diabetes mellitus, p.79; Study III - Salivary proteome and peptidome profiling in type 1 diabetes mellitus using a quantitative approach, p.89; Chapter. III, p.125; General Discussion, p.127; Chapter. IV, p.135; Conclusions, p.137; References, p.139; Apendix - Supplementary Data, p.163; Study I - Salivary peptidome in type 1 diabetes mellitus, p.165; Study II - Protease profiling of different biofluids in type 1 diabetes mellitus, p.207; Study III - Salivary proteome and peptidome profiling in type 1 diabetes mellitus using a quantitative approach, p.211;

Resumo: A diabetes Mellitus (DM) compreende um conjunto de desordens metabólicas comuns caracterizadas por hiperglicemia, que afeta diferentes órgãos do organismo. Ao longo do tempo, ocorrem danos microvasculares no glomérulo renal, retina e nervos periféricos, bem como doença macrovascular nas artérias. A composição da saliva também é afetada pela DM, com consequências na homeostasia oral. No entanto, o proteoma e o peptidoma salivar têm sido pouco explorados na DM tipo 1 e nas suas complicações crónicas. Tendo em conta o crescente interesse na saliva como fluido diagnóstico, o objetivo principal deste trabalho foi avaliar os eventos proteolíticos subjacentes à DM tipo 1 e às suas complicações microvasculares, bem como, caracterizar as alterações induzidas pela DM tipo 1 no proteoma e peptidoma salivar. A DM tipo 1 e particularmente as complicações microvasculares associadas modulam o perfil proteolítico dos fluidos biológicos, com diferenças significativas de atividade observadas na urina e saliva, atribuídas principalmente ao complexo Metaloproteinase da Matriz (MMP)-9/lipocalina associada à gelatinase de neutrófilos, aminopeptidase N, azurocidina e calicreína1. O aumento da atividade proteolitica observado na saliva total dos diabéticos resultou aumento da percentagem de péptidos, principalmente de um número acrescido de fragmentos de colagénio do tipo I, refletindo possivelmente um estado inflamatório crónico dos tecidos orais e periodontais. O peptidoma também corrobora uma maior suscetibilidade das proteínas salivares, especificamente, das proteínas ricas em prolina básicas (bPRP) 1. bPRP2 e proteínas ricas em prolina ácidas (aPRP) à proteólise, evidenciando a geração de fragmentos de proteínas associadas à ligação a bactérias.